dynamisk BIOSENSORS Normalization Solution Software User Guide

dynamic BIOSENSORS Normalization Solution Software User Guide

dynamisk-BIOSENSORER-LOGO

dynamisk BIOSENSORS Normalization Solution Software

dynamisk-BIOSENSORER-Normalisering-Løsning-Programvare-PRODUKT

Spesifikasjoner

  • Produktnavn: helicitet
  • Type: Normaliseringsløsning (rødt fargestoff)
  • Til: RT-IC målinger i rød kanal
  • Produsent: Dynamic Biosensors GmbH & Inc.
  • Bestillingsnummer: NOR-Ra
  • For forskning Bruk bare
  • Holdbarhet: Begrenset, sjekk utløpsdatoen på etiketten

Faktorer som påvirker eksitasjonskraft:

  1. Fluoroforkonsentrasjon i analyttløsning
  2. Forventet bindingssignal
  3. Chip-type

For spesifikk veiledning om eksitasjonskraft og normaliseringsløsningskonsentrasjon, se tabell 2 i brukerhåndboken. Merk at noe optimalisering kan være nødvendig basert på individuelle systemer.

Vanlige spørsmål

  • Spørsmål: Hvordan bør jeg lagre helicity?
    • A: Oppbevar heliXcyto i henhold til lagringsinformasjonen gitt i brukerhåndboken. Sørg for å sjekke utløpsdatoen på etiketten og bruk den før utløpsdatoen.
  • Spørsmål: Kan helicitet brukes til kliniske formål?
    • A: Nei, heliXcyto er kun til forskningsbruk og skal ikke brukes til klinisk diagnostikk eller behandling.

Nøkkelfunksjoner

  • For normalisering av de fluorescerende signalene på Spot 1 og Spot 2 på en heliXcyto-brikke
  • Muliggjør korrekt sanntidsreferanse av de røde fluorescerende signalene under RT-IC-målinger
  • Kompatibel med alle helicity-brikker
  • Normaliseringsløsningen (rødt fargestoff) inneholder et moderat hydrofilt rødt fargestoff med en enkelt positiv nettoladning

Produktbeskrivelse

  • Bestillingsnummer: NOR-Ra

Tabell 1. Innhold og lagringsinformasjon

Materiale Lokk Konsentrer handling Beløp Lagring
Normalisering løsning-Ra Oransje 10 µM 6 x 100 µL -20 °C
  • Kun til forskningsbruk.
  • Dette produktet har begrenset holdbarhet, se utløpsdatoen på etiketten.

Preparat

  • Bruk denne røde fargestoffnormaliseringsløsningen for RT-IC-målinger i den røde kanalen (analytetikettavhengig).
  • Fortynn 10 μM normaliseringsstamløsningen til en arbeidskonsentrasjon med en løpende buffer.
  • Konsentrasjonen av normaliseringsløsningen skal omtrent tilsvare fluoroforkonsentrasjonen i den høyeste analyttkonsentrasjonen som skal måles.

Dette kan beregnes ved å bruke følgende ligning:

  • dynamic-BIOSENSORS-Normalization-Solution-Software-FIG-1dynamic-BIOSENSORS-Normalization-Solution-Software-FIG-2: Konsentrasjon av normaliseringsløsningen i ønsket farge
  • dynamic-BIOSENSORS-Normalization-Solution-Software-FIG-3: Konsentrasjon av fargestoff i den merkede analyttløsningen
  • dynamic-BIOSENSORS-Normalization-Solution-Software-FIG-4: Høyeste konsentrasjon av analytt som bør måles
  • dynamic-BIOSENSORS-Normalization-Solution-Software-FIG-5: Grad av merking (forhold mellom fargestoff og analytt)

Fortynnede løsninger kan oppbevares ved 2-8°C i opptil 7 dager.

Søknadsmerknad

I RT-IC-målingen bør det fluorescerende signalet til normaliseringsløsningen være i samme område som det høyeste signalet som kommer fra den bundne analytten (rådata). Det absolutte fluorescerende signalet er avhengig av normaliseringsløsningens konsentrasjon og eksitasjonskraften som brukes i målingen. Eksitasjonseffekten må velges basert på følgende parametere:

  • en. Fluoroforkonsentrasjon i analyttløsning:
    • Fluoroforkonsentrasjonen avhenger av analyttkonsentrasjonen som brukes i målingen, samt graden av merking av analytten. For høye DOL- og høye analyttkonsentrasjoner kan det være nødvendig å redusere eksitasjonskraften.
  • b. Forventet bindingssignal:
    • Høyt uttrykte mål på en celle kan binde flere molekyler av den merkede analytten. Ved svært overuttrykte mål kan det forventes et sterkt bindingssignal. For å unngå at lukkeren lukkes, kan det vurderes å redusere eksitasjonseffekten.
  • c. Chip type:
    • Ulike brikketyper har varierende fluorescerende bakgrunn. Jo større feller og jo flere feller på brikken, jo høyere er bakgrunnssignalet. Derfor kan L5-brikker kreve lavere eksitasjonskraft enn M5-brikker.

For et utgangspunkt for eksitasjonskraft og norm. løsningskonsentrasjon som skal brukes i et RT-IC-eksperiment, se tabell 2. Tabell 2. Sammenheng mellom fluoroforkonsentrasjon, normaliseringsløsningskonsentrasjon og eksitasjonskraft som er egnet for en heliXcyto M5-brikke

Analytt fargestoff kons. = analytt ulemper x DOL Eksitasjonskraft Konsentrasjonsnormaliseringsløsning Fortynning Normaliseringsløsning
25 nM 0.5 25 nM 1:400
50 nM 0.3 50 nM 1:200
100 nM 0.2 100 nM 1:100
300 nM 0.1 300 nM 1:33
500 nM 0.08 500 nM 1:20
1 µM 0.05 1 µM 1:10
2.5 µM 0.02 2.5 µM 1:4

Note: Denne tabellen er til veiledning. Det endelige signalet som registreres i heliciteten avhenger imidlertid av mange faktorer. Det vil derfor være nødvendig med noe optimalisering for hvert system.

Kontakt

Dokumenter / Ressurser

PDF thumbnailProgramvare for normaliseringsløsning
User Guide · NOR-Ra, Normalization Solution Software, Solution Software, Software

Referanser

Still et spørsmål

Use this section to ask about setup, compatibility, troubleshooting, or anything missing from this manual.

Still et spørsmål

Ask about setup, compatibility, troubleshooting, or anything missing from this manual. Name and email are optional.